D-Valine, 3-mercapto-, lead complex

Genetic toxicity: in vitro

Administrative data

Endpoint:

in vitro gene mutation study in bacteria

Remarks:

Type of genotoxicity: gene mutation

Type of information:

experimental study

Adequacy of study:

key study

Study period:

1996

Reliability:

1 (reliable without restriction)

Rationale for reliability incl. deficiencies:

other: Guideline-Studie, ausführlich dokumentiert

Data source

Reference

Reference Type:

study report

Title:

Unnamed

Year:

1996

Report date:

1996

Materials and methods

Test guideline

Qualifier:

according to guideline

Guideline:

OECD Guideline 471 (Bacterial Reverse Mutation Assay)

Deviations:

not specified

GLP compliance:

yes (incl. QA statement)

Type of assay:

bacterial reverse mutation assay

Test material

Test material information

Constituent 1

Reference substance name:

Penicillamin-Bleisalz

IUPAC Name:

Penicillamin-Bleisalz

Constituent 2

Reference substance name:

Bleisalz der 2-Amino-3-mercapto-3-methylbuttersäure

IUPAC Name:

Bleisalz der 2-Amino-3-mercapto-3-methylbuttersäure

Test material form:

solid: particulate/powder

Remarks:

migrated information: powder

Details on test material:

- Analytical purity: >99.0%
- Lot/batch No.: 120595
- Expiration date of the lot/batch: mind. bis 05/2000

Kommentar:
Stoff entspricht: Lead, [3-mercapto-D-valinato(2-)-N,O,S]-

Method

Species / strain

Species / strain / cell type:

S. typhimurium TA 1535, TA 1537, TA 98 and TA 100

Metabolic activation:

with and without

Metabolic activation system:

S9-Mix Leberhomogenat (S9), das aus der Leber von Wistar-Ratten gewonnen wurde, die 5 Tage zuvor mit 500 mg/kg Aroclor 1254 in Olivenöl i.p. einmalig behandelt wurden.

Test concentrations with justification for top dose:

0,1 mL/Platte (im Vortest auch 0,2 mL/Platte)
Vortest mit den Stämmen TA 98 und TA 100: 6 Konzentrationsstufen 18,8 - 600 µg/Platte
Haupttest: 4, 12, 36, 108, 324 µg/Platte
Höhere Konzentrationen konnten aufgrund der begrenzten Löslichkeit der Prüfsubstanz nicht getestet werden.

Vehicle / solvent:

- verwendete Lösungsmittel: DMSO; Wasser; 1%ige Salzsäure

Controls

Negative solvent / vehicle controls:

yes

Remarks:

DMSO, 1% HCl, Wasser (Aqua p.i. (unbehandelt)

Positive controls:

yes

Positive control substance:

9-aminoacridine

other: Natriumazid, 2-Nitrofluoren, 2-Aminoanthracen

Remarks:

alle Referenzsubstanzen in DMSO gelöst

Details on test system and experimental conditions:

METHOD OF APPLICATION: in agar (plate incorporation)

DURATION
- Preincubation period: Vorinkubation 1 h, Bebrütung 65 h
- Exposure duration: Vortest 68 h, Plattentest 64 h

NUMBER OF CELLS EVALUATED:
Dichte der Ausgangs-Bakteriensuspensionen 0,5-0,9x10exp9 Zellen/ml

Results and discussion

Test results

Species / strain:

S. typhimurium TA 1535, TA 1537, TA 98 and TA 100

Metabolic activation:

with and without

Genotoxicity:

negative

Cytotoxicity / choice of top concentrations:

no cytotoxicity

Vehicle controls validity:

valid

Untreated negative controls validity:

not applicable

Positive controls validity:

valid

Any other information on results incl. tables

Penicillamin-Bleisalz ruft bei den gewählten Teststämmen keinen reproduzierbaren dosisabhängigen Anstieg bis zu 324 µg/ Platte hervor.

Tabelle 1: Auswertung Plattentest - Steigerungsraten der Revertanten-Zahlen

Substanz	Bakterienstamm S. typhimurium
	TA 98		TA 100		TA 1535		TA 1537
	S 9-Mix
	-	+	-	+	-	+	-	+
Lösungsmittelkontrolle^1)
Aqua p.i.
1% HCl	1,4	0,9	0,9	0,7	0,9	0,9	0,8	0,4
DMSO	1,4	1,0	1,0	1,0	0,7	1,2	1,0	1,0
Penizillamin-Bleisalz^2)
4 µg/Platte	0,9	1,0	1,0	1,0	1,3	1,1	1,4	2,2
12 µg/Platte	0,9	1,1	1,0	1,3	1,2	1,0	1,1	2,0
36 µg/Platte	0,8	1,0	1,0	1,2	1,1	1,1	1,1	2,0
108 µg/Platte	1,2	1,0	1,0	1,2	1,0	0,9	1,6	2,1
324 µg/Platte	1,0	1,0	0,8	1,1	0,8	1,2	0,9	2,2
Positivkontrollen^3)
NaN3			10,8		120,7
2-NF	34,0
9-AA							172,3
2-AA		62,2		17,9		20,6		14,6
Die Zahlenwerte stellen den Quoteniten aus Revertantenzahl der Substanz (bzw. des Lösungsmittels) und der Revertantenzahl der Lösungsmittelkontrolle (bzw. von Wasser) dar.
1) … Quotienten bezogen auf Wasser
2) … Quotienten bezogen auf 1% HCl
3) … Quotienten bezogen auf DMSO

Tabelle 2: Auswertung Präinkubationstest - Steigerungsraten der Revertanten-Zahlen

Substanz	Bakterienstamm S. typhimurium
	TA 98		TA 100		TA 1535		TA 1537
	S 9-Mix
	-	+	-	+	-	+	-	+
Lösungsmittelkontrolle^1)
Aqua p.i.	1,0	1,0	1,0	1,0	1,0	1,0	1,0	1,0
1% HCl	1,0	1,2	1,0	0,9	1,0	1,2	1,2	0,9
DMSO	0,8	0,8	0,7	0,7	1,2	0,8	0,9	0,8
Penizillamin-Bleisalz^2)
4 µg/Platte	0,7	0,9	1,0	1,0	1,6	0,9	1,1	1,1
12 µg/Platte	0,6	0,8	1,0	1,1	1,7	1,0	1,3	1,3
36 µg/Platte	0,8	0,9	0,9	1,0	1,7	1,0	1,3	1,3
108 µg/Platte	0,9	1,0	1,0	0,9	1,4	1,0	1,2	1,4
324 µg/Platte	1,0	1,0	1,0	0,9	1,5	1,6	0,9	1,5
Positivkontrollen^3)
NaN3			15,4		107,1
2-NF	49,9
9-AA							90,8
2-AA		3,0		3,2		3,5		2,9
Die Zahlenwerte stellen den Quoteniten aus Revertantenzahl der Substanz (bzw. des Lösungsmittels) und der Revertantenzahl der Lösungsmittelkontrolle (bzw. von Wasser) dar.
1) … Quotienten bezogen auf Wasser
2) … Quotienten bezogen auf 1% HCl
3) … Quotienten bezogen auf DMSO

Spontanraten liegen in den aus Literaturangaben resultierenden Bereichen (de Serres und Shelby, 1979)und stimmen mit den Ergebnissen vorangegangener Prüfungen in im Prüfinstitut überein. Der Befund beim Stamm TA 1537 im Plattentest unter Mitwirkung des S9 -Mix in dem das Lösungsmittel 1%ige Salzsäure eine Verringerung der Spontanrate auf 0,4 bewirkte, wurde durch den Präinkubationstest nicht bestätigt und kann als zufällig bewertet werden.

Beim Stamm TA 1537 kam es unter Mitwirkung des metabolisierenden Systems in allen Konzentrationen zu einer Verdoppelung der Revertanten-Zahlen im Vergleich zur Lösungsmittelkontrolle. Diese Erhöhung ist nicht konzentrationsabhängig und wurde durch den zwieten, den Präinkubationstest nicht bestätigt. Es ist anzunehmen, dass dieser Befund nicht auf eine Substanzwirkung zurückzuführen ist. Als Ursache dafür ist vielmehr die weiter oben beschriebene und als zufällig bewertete Verringerung der Reveratanten-Zahl bei der Lösungsmittelkontrolel 1%ige Salzsäure in dieser Versuchsreihe anzusehen.

Literatur:

F. J. de Serres, M.D. Shelby; Mutation Res. 64 (1979), 159 -165

Applicant's summary and conclusion

Conclusions:

Interpretation of results (migrated information):
negative

Ein Potential zur Induktion von Genmutationen durch Penicillamin-Bleisalz konnte im Konzentrationsbereich <=324 µg/Platte nicht nachgewiesen werden.