Registration Dossier

Toxicological information

Toxicity to reproduction

Currently viewing:

Administrative data

Endpoint:
toxicity to reproduction
Remarks:
other: Subchronic toxicity
Type of information:
experimental study
Adequacy of study:
supporting study
Study period:
1996-08-19 to 1996-11-22
Reliability:
2 (reliable with restrictions)
Rationale for reliability incl. deficiencies:
other: Comparable to guideline study with acceptable restrictions: Limited documentation

Data source

Reference
Reference Type:
study report
Title:
Unnamed
Year:
1997

Materials and methods

Principles of method if other than guideline:
NTP Test Protocol, see Test Conditions
GLP compliance:
yes
Limit test:
no

Test material

Reference
Name:
Unnamed
Type:
Constituent
Details on test material:
no data

Test animals

Species:
mouse
Strain:
B6C3F1
Sex:
male/female
Details on test animals and environmental conditions:
TEST ORGANISMS
- Source: Taconic, Germantown (New York, USA)
- Age: approximately 6 weeks at first exposure
- Number of animals: 10 per dose and sex

Administration / exposure

Route of administration:
inhalation
Type of inhalation exposure (if applicable):
whole body
Vehicle:
other: air
Details on exposure:
ADMINISTRATION / EXPOSURE 
- Type of exposure: whole-body inhalation
Details on mating procedure:
no mating
Duration of treatment / exposure:
Exposure period: 13 weeks
Frequency of treatment:
6 h/day, 5 days/week; additionally: last sunday before terminal sacrifice
Doses / concentrations
Remarks:
Doses / Concentrations:
7.5; 15; 30; 60; 120 ppm = 41.2; 82.4; 165; 330; 660 mg/m3 (nominal)
Basis:

Control animals:
yes, concurrent no treatment
Details on study design:
SATELLITE GROUPS AND REASONS THEY WERE ADDED: As part of the disease  control program, five male and five female mice were submitted for a 
pre-exposure health examination. Sera were collected from five mice of  each sex from extra animals 20 days after arrival and from the control  
group at the end of the study. Sera were tested for viral and mycoplasmal  antibodies.

Examinations

Parental animals: Observations and examinations:
CLINICAL OBSERVATIONS AND FREQUENCY: 
- Clinical signs: twice daily including weekends
- Mortality: twice daily including weekends
- Body weight: weekly
- "Observations": weekly
- Hematology: All animals were bled at terminal necropsy. Hematologic  evaluations included: red blood cell count, volume of packed cells & spun  
hematocrit, hemoglobin, mean corpuscular volume, mean corpuscular  hemoglobin, mean corpuscular hemoglobin concentration, white blood 
cell  count, differential count (absolute), absolute reticulocyte count,  platelet count & morphologic assessment, erythrocyte morphologic  
assessment.
ORGANS EXAMINED AT NECROPSY (MACROSCOPIC AND MICROSCOPIC): 
- Macroscopic: Complete necropsy; weights of liver, thymus, right kidney,  right testis, heart, lungs.
- Microscopic: Complete histopathology on all 0- and 120-ppm mice  included the following tissues: adrenal glands, brain, clitoral glands,  
esophagus, femur (including bone marrow & joint surfaces), gallbladder,  gross lesions, tissue masses, regional lymph nodes, heart, aorta, large  
intestine (cecum, colon, rectum), small intestine (duodenum, jejunum,  ileum), kidneys (left only for males), larynx, liver, lungs & mainstem  
bronchi, lymph nodes (mandibular, mesenteric, bronchial, mediastinal),  mammary glands & adjacent skin, nasal cavity & nasal turbinates (three  
sections), ovaries, pancreas, parathyroid glands, pituitary glands,  preputial glands, prostate, salivary glands, spleen, stomach (forestomach  & 
glandular), testes, epididymis, seminal vesicles, thymus, thyroid  glands, trachea, urinary bladder, uterus.   
Target tissues identified at 120 ppm were examined at lower  concentrations to no-effect level or lowest exposure concentration. 
Gross  lesions were examined in all groups.
OTHER EXAMINATIONS: 
- Micronuclei in erythrocytes: Two blood smears were taken from all core  study animals at necropsy. One of these slides was subject to 
micronuclei  determination.
- Sperm morphology & vaginal cytology (SMVCE): Vaginal cytology was  evaluated for 12 days during the last 2 weeks of the study on all  remaining 
females in the 0-, 30-, 60-, and 120-ppm groups. Epididymal  sperm concentration, spermatid heads/testis, and left caudal, epididymal  & 
testicular weights were evaluated in surviving males from the same  groups.
Statistics:
STATISTICAL METHODS: A modified Dunnett's t-test (Xybion Path / Tox  System; Cedar Knolls, New Jersey) was used to compare the treated groups  
to the control group with respect to body and organ weights, and  organ:body weight ratios. Corresponding statistics for hematology, and  clinical 
chemistry were calculated using the Statistical Analysis System  (SAS Institute; Berkeley, California).

Results and discussion

Results: P0 (first parental animals)

Details on results (P0)

NOAEL (NOEL), LOAEL (LOEL): ignoring transitional epithelial eosinophilic  granules of urinary bladder:
- females: NOAEL = 7.5 ppm (uterus atrophy)
- males: NOAEL = 15 ppm (dark-colored urine); decreased kidney weights at  this dose, but not at 30 ppm
TOXIC RESPONSE/EFFECTS BY DOSE LEVEL: 
- Mortality and time to death: no mortalities in any group
- Clinical signs: no gross observations in any group
- Body weight gain: lower by 8.9 % (males, significant) and 7.0 %  (females, insignificant), respectively, in highest dose groups
- Haematology: Total erythrocytes and packed cell volumes were decreased,  accompanied by increased mean corpuscular hemoglobin, mean 
corpuscular  volume, and mean corpuscular hemoglobin concentration measurements and  reticulocyte concentrations in both sexes at 60 or 
120 ppm. Platelet  concentrations were increased in these same groups.
- Urinalysis:    Dark-colored urine at 30 ppm (7/10 each for males and females) and  higher (all animals)
- Organ weights:   
Kidney: relative and absolute weights of right kidneys reduced in males  of 15, 60, and 120 ppm groups   
Liver: relative liver weights increased for males (120 ppm) and females (60 and 120 ppm), may be primarily attributed to lower  body weight gain in 
these groups   Heart: relative (120 ppm) and absolute (60 and 120 ppm) decrease in  males
- Gross pathology: no gross observations in any group
- Histopathology:   No lesions were observed in the liver, kidney, heart, or testes that  correlated with any of the weight changes observed.    
Atrophy of olfactory epithelium correlated very well with observations  in the previous 14-day study.    
Ovary and uterus atrophy was observed in high dose females. Incidences  of ovary atrophy at minimal doses of observation and above were 
4/10 (330  mg/m3), and 8/10 (660 mg/m3). Incidences of uterus atrophy at minimal  doses of observation and above were 2/10 (82.4 mg/m3), 
2/10 (165 mg/m3),  6/10 (330 mg/m3), and 8/10 (660 mg/m3). Information on severity is not  reported.    Transitional epithelial eosinophilic 
granules were observed in the  urinary bladder of all animals exposed (dose-related), the significance  of this finding is unclear.

Overall reproductive toxicity

Reproductive effects observed:
not specified

Applicant's summary and conclusion